О КОМПАНИИ
ООО "ВиАТорг"
г. Белгород
ПРОДУКЦИЯ
Cосуды Дьюара криобиологические
КОНТАКТЫ
Связь с нами

ПРОДУКЦИЯ
Cосуды криобиологические (Сосуды Дьюара)



КОНТАКТЫ
ООО "ВиАТорг", г. Белгород
Компания "ВиАТорг" официальный представитель Харьковского завода транспортного оборудования в России поставляет криобиологические сосуды (Сосуды Дьюара) по России и странам СНГ.
У нас Вы можете купить Сосуды Дьюара недорого

E-mail:viatorg@yandex.ru

СТАТЬИ
Биотехнологии, принципы и применение


Партнеры
Объявления


Популярное
Интересные факты криобиологии
Технология рекомбинантных ДНК (Инсулин)
Общеизвестно, что разработка методов изменения генетическо­го аппарата клеток, позволяющих вводить в них чужеродные гены, клонировать их, экспрессировать и получать нужные про­дукты, совершила настоящ ...

Биодеградация нефтяных загрязнений
Рассмотрим теперь процессы биодеградации сложных смесей углеводородов и их производных в средах, загрязненных нефтью. Речь пойдет как о сточных водах нефтяной промыш­ленности, так и о загрязнении нефт ...

Биотопливные элементы
После того как в конце XIX в. были созданы топливные эле­менты, появилась возможность эффективно осуществлять пре~ вращение химической энергии в электрическую. Дело в том, что на эти элементы не распр ...

Подходы к усовершенствованию производства микробных полисахаридов
Использование микроорганизмов для получения промышленно ценных полисахаридов можно сделать более эффективным с помощью следующих усовершенствований: 1) увеличения ско­рости образования полисахаридо ...

Dewar's flask
Dewar's flask Sir James Dewar © MARY EVANS PICTURE LIBRARY We have all been there. You are at a party where you know almost no one. Eventually you strike up a casual con ...

Криобиологические сосуды (Сосуды Дьюара)
Компания ООО "ВиАТорг" официальный представитель Харьковского завода транспортного оборудования в России (г. Белгород) поставляет по РФ и СНГ криобиологические сосуды (Сосуды Дьюара). Предлагаем с ...

Материалы, подверженные биоповреждениям
При описании биоповреждений легче всего проводить их клас­сификацию по типу продукта. Однако это оказывается затруд­нительным, если мы имеем дело со сложными продуктами, на­пример с красками, где встр ...

Поверхностные покрытия
Поверхностные покрытия (краски, различные типы лаков) иг­рают двоякую роль: они выполняют декоративную функцию и защищают покрываемую поверхность от вредных воздействий среды, в том числе и от микроор ...

Пренатальная диагностика наследственных болезней
Многие методы молекулярной генетики начинают широко применяться в пренатальной диагностике наследственных болезней,, например гемоглобинопатии. Так, в 1978 г. Кен и Доузи раз­работали метод диагностик ...

Внеклеточное комплексообразование
Некоторые микроорганизмы синтезируют специфические хими­ческие соединения, обладающие высоким сродством к опреде­ленным металлам. Наиболее известны соединения, образующие-комплексы с железом. Молибден ...

Производство аминокислот из биосинтетических предшественников
Использование предшественников при производстве аминокис­лот позволяет успешно «обходить» метаболический контроль, осуществляющийся по механизму обратной связи и репрессии. Рассмотрим процесс синтеза ...

Курдлан
Курдлан —это а-1,3-глюкан, синтезируемый Alcaligenes faecalis, var. myxogenes, штамм 10СЗ. При нагревании до темпера­туры выше 54 °С происходит необратимое гелеобразование это­го полимера; прочн ...

Виннокаменная кислота
Виннокаменная кислота является обычным побочным про­дуктом виноделия. Однако ее можно получать и путем микроб-уной трансформации 5-оксоглюконовой кислоты. Штаммы, способные превращать глюкозу в 5-оксо ...

Аэробная переработка отходов в сельском хозяйстве
Если сельское хозяйство ведется традиционными способами, то отходов животноводства образуется немного, и их несложно' использовать для удобрения ^расположенных поблизости пахот­ных земель. Сегодня, к ...

Биологический контроль
Уже в самом начале развития микробиологии стало известна, что одни микроорганизмы могут подавлять рост других. Наи­более важным результатом интенсивных исследований в этой области было, наверное, откр ...

Правила техники безопасности в биотехнологической промышленности и контроль ...
Как известно, существуют стандарты безопасности новых видов продукции. К числу наиболее строгих из них относятся те, ко­торые касаются медицинских препаратов,   а также продуктов, потребляемых в живот ...

Переработка отходов
Тысячелетиями отходы деятельности человека перерабатыва­лись естественным путем, при участии соответствующих микро­организмов. В наиболее широко распространенных установках для очистки сточных вод вып ...

Сброженная пахта
Сброженный продукт получают из свежей пахты, а чаще из снятого молока путем добавления закваски, используемой при производстве масла. Эта закваска представляет собой смесь молочнокислых стрептококков ...

Окружающая среда
По мере того как увеличивается население Земли и развивает­ся промышленность, все более серьезной становится проблема охраны окружающей среды. В решении такого рода задач био­технология будет играть в ...

Исторические перспективы
До тех пор, пока всеобъемлющий термин «биотехнология» не стал общепринятым, для обозначения наиболее тесно связанных с биологией разнообразных технологий использовали такие на­звания, как прикладная м ...


Регенерация растений из протопластов
Биотехнологии » Сельское хозяйство и биотехнология


Шеферд и Тоттен (Shephard, Totten, 1977 г.) в опытах с кар­тофелем, у которого регенерация растений из культуры тканей затруднена, разработали метод, позволяющий достаточно успеш­но регенерировать растения из протопластов. Их способ был несколько необычным, поскольку предусматривал особые усло­вия выращивания растений, из которых потом получали прото­пласты. Кроме того, на каждой стадии развития растений-реге-нерантов они применяли особую среду.
Выращивание растений для опытов
Растения картофеля (американский сорт Russet Burbank) вы­ращивали из клубней, свободных от Х-вируса, при высокой освещенности (продолжительность светового дня 12 ч), при 24°С и относительной влажности 70—75%. Перед началом опыта рас­тения выдерживали 4—10 сут при той же температуре и влаж­ности, но более слабом (7000 люкс) и менее продолжительном освещении (6 ч в сутки). Содержание растений в условиях сла­бого и непродолжительного освещения приводило к существен­ному увеличению выхода жизнеспособных протопластов из тка­ней листьев (до 2—3-106 на 1 г ткани).
Среды для выделения и размножения
При выделении и размножении протопластов применяли среды пяти типов (А—-Е), которые представляли собой варианты среды, предложенной Лэмом (Lam, 1975). В их состав входили основные питательные вещества растений, микроэлементы, аминокислоты, факторы роста, фитогормоны и регуляторы осмоти­ческого давления. Содержание веществ подбиралось так, чтобы обеспечить оптимальный рост на каждом этапе регенерации. Все среды содержали 1,5—2,0% агара, кроме полужидкой сре­ды А, где его концентрация составляла только 0,5%. Среды D и Е, использованные на заключительном этапе, содержали 1650 мг/л NH4NO3.
Выделение протопластов
4 г ткани, вырезанной из стерилизованных с поверхности моло­дых листьев, инкубировали в 200 мл среды А (без сахарозы и агара) в темноте при 4°С в течение 16—24 ч. Затем среду за­меняли на 100 мл забуференного (рН 5,6) раствора с фермен­тами, чтобы отделить мезофильные клетки и удалить их клеточ­ные оболочки. При встряхивании смеси процесс заканчивался за 4 ч при 28 °С. Жизнеспособные протопласты после процежи­вания смеси собирали центрифугированием, промывали сре­дой А, снова осаждали и хранили в жидкой среде А при кон­центрации 6-105 клетка/мл.
Рост каллуса
При инкубации протопластов на твердой среде В или на моди­фицированной твердой среде происходит регенерация клеточных стенок и ограниченное деление клеток, в результате чего обра­зуются микрокаллусы. После переноса в среду С они растут далее до стадии, когда становится возможным перенос в сре­ду D, где индуцируется образование (морфогенез) побегов. На заключительной стадии каллусы с побегами длиной около 1 мм переносят на среду Е для завершения образования побегов и формирования корней. Укорененные растения пересаживают в небольшие горшочки с вермикулитом, где они и растут далее.
Здесь изложена суть метода, который следует использовать для регенерации целых растений из одиночных протопластов, и проиллюстрировано, как экспериментатору приходится варь­ировать условия на разных стадиях развития, чтобы добиться успеха. На рис. 9.7—9.10 показано, как выглядят свежевыде­ленные протопласты, молодые каллусы и крошечные растения, регенерированные из ткани каллуса. Особенно важно в этой работе строго выдерживать надлежащие условия, однако почти наверняка их придется специально подбирать для каждого изу­чаемого вида растений.
Томасу (Thomas, 1981) удалось получить культуры побегов тетраплоидного картофеля сорта Maris Bard, которые использо­вались как исходный материал для выделения протопластов.
 Свежевыделенные протопласты Solanum brevidens

Рис. 9.7. Свежевыделенные протопласты Solanum brevidens.
Каллусы, образовавшиеся из протопластов
 
Рис 9.8. Каллусы, образовавшиеся из протопластов Solarium brevidens на ага­ре. Снимок сделан примерно через месяц после получения протопластов Для выращивания использована чашка Петри диаметром 9 см.
Регенерация мини-растений Solarium tuberosum
 
Рис. 9.9. Регенерация мини-растений Solarium tuberosum из каллусной ткани, полученной из протопластов (снимок сделан примерно через 100 сух после пе­ренесения на агаровую среду, способствующую регенерации).
Регенерация мини-растений Solarium brevldens
 
Рис. 9.10. Регенерация мини-растений Solarium brevldens из каллусной ткани, полученной из протопластов (снимок сделан приблизительно через 100 сух после перенесения на агаровую среду, способствующую регенерации).

Пазушные почки стерилизовали с поверхности раствором гипо-хлорида натрия и культивировали затем на среде Мурасиге и Скуга (Murashige, Skoog, 1962), содержащей, кроме того, сахарозу (30 г/л), агар (6 г/л) и 6-бензиламинопурин (6-БАП, 0,5 мг/л), рН 5,8. В ходе инкубации при 26 °С при освещенности ~400 люкс (16 ч днем, 8 ч ночью) за 3—5 нед образовывались ростки длиной около 3 см. Их можно было использовать для дальнейшего размножения на той же среде, но без 6-БАП, для чего брали короткие (3—8 мм) отрезки стебля с листом и па­зушной почкой. Рост продолжался три недели, после чего по­беги можно было опять использовать для размножения или же выделения протопластов. Цельные проростки (но не взятые от­дельно листья) давали жизнеспособные протопласты, которые могли длительное время делиться в культуре.



Другие новости по теме:

  • Использование протопластов в селекции растений
  • Образование гибридов растений путем слияния протопластов
  • Методы слияния протопластов
  • Слияние протопластов
  • Инокуляция эндофитом


  •  (голосов: 0)

    ООО "ВиАТорг" © 2009
    Rambler's Top100 Рейтинг@Mail.ru