Криобиологические сосуды > Генетика и биотехнология > Транспозоны

Транспозоны


Транспозоны и вставочные последовательности — это сходные-элементы в хромосомных ДНК бактерий, ДНК бактериофагов, и плазмид. В опытах с. бактериями транслозоны используются» для получения мутантов и для клонирования нужных бакте­риальных генов. Открыты они были Хеджесом и Жакобом, ко­торые показали, что небольшой фрагмент плазмиды RP4, опре­деляющий устойчивость к пенициллину, может встраиваться в другие плазмиды, последовательность которых не гомологич­на RP4. Обычный механизм рекомбинации в клетках бактерий, основанный на взаимодействии гомологичных молекул ДНК и зависимый от продукта бактериального гена rec А+, в переносе этого гена устойчивости к антибиотику не используется. В по­следующие годы было описано множество других транспозонов. Большинство из них было обнаружено в R-плазмидах грамот-рицательных бактерий; обычно они придают им устойчивость к антибиотикам. Лучше всего изучен транспозон ТпЗ длиною 4957 пар нуклеотидов, обеспечивающий устойчивость к пени­циллину. Последовательности из 38 пар нуклеотидов на концах Тп<3 одинаковы, но противоположно направлены. В транспозо-не закодирована информация о ферменте транспозазе, играющем важную роль в его перемещениях (транспозициях). Этот транспозон может встраиваться во множество сегментов молекулы ДНК, но предпочитает АТ-богатые участки.
Транспозоны могут служить маркером гена, предназначен­ного для клонирования. Как известно, при клонировании хро­мосомных генов бактерий иногда возникают сложности, свя­занные с тем, что нет простого метода, позволяющего выявить, какая из плазмид, несущих встроенный фрагмент хромосомной ДНК, содержит интересующий исследователя ген. Иногда эту проблему удается решить, выделив сначала мутант по этому тену с включенным в него или расположенным поблизости транспозоном.